本文標題:"分子質(zhì)量標志物用來測定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)"
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分子質(zhì)量標志物用來測定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)
普通分子質(zhì)量標志物的應用和制備
分子質(zhì)量標志物的最大用途是測定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)和分
子質(zhì)量,可分為單個樣品和混合樣品的標志物。盡管有諸多限制,
但是仍可與通過水溶性球狀蛋白的比較,按下述公式推算出分子質(zhì)
量:
提供了一些水溶性蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)和分子質(zhì)量。對于一個給
定的沉降實驗,最好選用沉降系數(shù)在預期范圍內(nèi)的2或3種蛋白質(zhì)作
為標準。對于特殊樣品,要盡量尋找分子質(zhì)量在預期范圍內(nèi)的蛋白
質(zhì)作為標準。然而,這些標準不適合于計算有不同偏微比容(u)蛋
白質(zhì)的沉降系數(shù)。盡管如此,可溶性標準品在比較不同的沉降方式
和確保梯度的重復性方面非常有用。此外,測得的相對沉降系數(shù)可
用于測定一個給定蛋白質(zhì)亞單位的寡聚體,而不用考慮它的構(gòu)象。
最后,通過與相關(guān)標準蛋白質(zhì)的比較,可以估算出蛋白質(zhì)的分子質(zhì)
量。然而,必須認識到這種分析是假設結(jié)合了去污劑的測試樣品和
標準品有相似的微分比容,因而有其局限性。表6.2.2常用標準
蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)、偏微比容和分子質(zhì)量。
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